Isolation of bothrasperin, a disintegrin with potent platelet aggregation inhibitory activity, from the venom of the snake <i>Bothrops asper</i>

Resumen

El veneno de la serpiente Bothrops asper induce graves alteraciones de la coagulación en los humanos accidentalmente envenenados. Sin embargo, se han realizado pocos estudios para identificar los componentes del veneno que interactúan con el sistema hemostático. En el presente trabajo, fraccionamos el veneno de B. asper para investigar la posible presencia de inhibidores de la agregación plaquetaria. Empleando una combinación de técnicas cromatográficas (filtración en gel, intercambio aniónico y cromatografía líquida de alto desempeño en fase reversa), aislamos una proteína acídica de cadena simple, con una masa molecular de ~8 kDa, estimada mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS. Su secaminoácidos N-terminal muestra una alta similitud con la de disintegrinas aisladas de diferentes venenos de serpiente, las cuales se unen a integrinas celulares como el receptor de fibrinógeno GPIIb/IIIa de las plaquetas. La proteína purificada ejerce una potente acción inhibitoria sobre la agregación in vitro de plaquetas humanas estimuladas con ADP, con una IC50 estimada en 50 nM. Esta actividad biológica, sumada a las características bioquímicas observadas, demuestran que la proteína aislada del veneno de B. asper es una disintegrina, a la cual denominamos “bothrasperina”. Esta es la primera disintegrina aislada de una especie de vipéridos de Centroamérica.